Caracterização molecular de Hepatozoon canis em Portugal

Resumo

Objectivos: Foram detetados gamontes, suspeitos de Hepatozoon canis, no sangue periférico de uma cadela que se apresentou no Hospital Escolar da Faculdade de Medicina Veterinária da Universidade Lusófona. Hepatozoon canis é um protozoário transmitido por vetores que afeta o cão doméstico, adquirido através da ingestão de carraças infetadas, que tem vindo a ser detetado em Portugal desde 1988. Contudo, o conhecimento sobre as suas características moleculares é vago. Este estudo pretendeu analisar a composição molecular do gene da pequena subunidade do RNA ribossomal (18S-rRNA) de H. canis relatado em Portugal.

Materiais e Métodos: Foi extraído DNA para amplificar uma região do 18S-rRNA por PCR e o amplicão foi sequenciado pelo método de Sanger. Foram obtidas da base de dados GenBank as sequências de 18S-rRNA de H. canis reportadas em Portugal, assim como sequências de H. canis reportadas em outros países e sequências de outras espécies para análise filogenética. As sequências foram alinhadas pelo método MAFFT G-INS-i e foi construída uma árvore por inferência filogenética baseada em máxima verosimilhança. Foi estimada a percentagem de identidade entre sequências H. canis com a ferramenta SIAS.

Resultados: A análise da sequência pela ferramenta Blastn sugere que se trata de H. canis (99.82% identidade e 100% cobertura, MK091088). Após eliminação de sequências redundantes, obteve-se 4 sequências distintas que foram comparadas com a obtida no presente estudo. Estas sequências mostraram um alto grau de identidade que variou entre 93% e 100%. A árvore filogenética mostra uma clara separação entre as sequências de H. canis e as sequências das restantes espécies, contudo não evidencia nenhum subgrupo dentro das sequências H. canis.

Conclusões: A análise do gene 18S-rRNA verificou homogeneidade das sequências de H. canis reportadas em Portugal e não detetou diferenças significativas entre estas e as sequências de H. canis detetadas em outros países.

Palavras chave: Hepatozoon canis; Portugal; Filogenia; 18S-rRNA.

Financiamento: Projeto exploratório DeVPat - Projetos de Investigação da Faculdade de Medicina Veterinária da Universidade Lusófona 2022.